Rabies Virus Antibody Test Kit (Enzyme-Linked Immunoassay)
Product name
Generic Name: Rabies Virus Antibody Test Kit (Enzyme-Linked Immunoassay)
Packaging specifications
96T ×1/box
Detection principle
This kit consists of a pre-coated rabies virus enzyme-labeled plate, enzyme labels, and other supporting reagents, and uses the principle of enzyme-linked immunosorbent (ELISA) to detect rabies virus antibodies in canine serum or plasma samples. During the experiment, the control serum and the sample to be tested are added to the microplate labeled plate. After incubation, if the sample contains rabies virus antibodies, they will bind to the antigen on the microplate and wash to remove unbound components; Enzyme markers are then added to specifically bind to antigen-antibody complexes on the microplate labeled plates; Then, wash to remove unbound enzyme markers, add TMB substrate solution to the well, and react with the enzyme-labeled conjugate to form blue products. The depth of color development is positively correlated with the specific antibody content in the sample; After adding the termination solution to terminate the reaction, the product turns yellow; By measuring the absorbance value of each reaction well at a wavelength of 450nm using a microplate reader, it can be determined whether the sample contains rabies virus antibodies. Antibody levels are used to preliminarily determine whether the subject is infected with the rabies virus.
Composition of the kit
Serial number | Name | Specification: 96T |
1 | Enzyme markers | 11ml×1 |
2 | Sample diluent | 20ml×1 |
3 | 20X concentrated detergent | 40ml×1 |
4 | Substrate liquid A | 6ml×1 |
5 | Substrate liquid B | 6ml×1 |
6 | Stop fluid | 11ml×1 |
7 | Positive control | 1.0ml×1 |
8 | Negative control | 1.0ml×1 |
9 | Enzyme-labeled plates | 96T×1 |
10 | Sealing the plate film | 1 |
Storage and expiration date
Store at 2~8°C, shelf life is 12 months.
After opening, please store the blanket board at 2~8°C away from light to avoid moisture. The usage period is 2 months.
Applicable instruments
Includes a 450nm wavelength microplate reader, 37°C constant temperature equipment, and adjustable micropipettes.
Sample preparation
1. Prepare serum from whole animal blood using conventional methods, ensuring the serum is clear, free of hemolysis, and free of contamination. Samples can be stored at 2~8°C for 1 week, and should be stored at -20°C for extended periods.
2. Prepare the corresponding number of small-scale EP tubes or serum dilution trays according to the sample quantity, and use the sample diluent to dilute the serum to be tested at a 50-fold ratio (e.g., add 4μl serum to 196μl sample dilution and mix well). Negative and positive controls do not require dilution.
3. Before use, the concentrated detergent should be returned to room temperature to dissolve the precipitate, then dilute 20 times with distilled or deionized water to make a working detergent (e.g., 19 parts distilled or deionized water plus 1 part concentrated detergent).
Inspection methods
1. Antes de usar, deixe o kit em temperatura ambiente por 30 minutos para que retorne à temperatura ambiente.
2. Pegue a quantidade necessária de lâminas etiquetadas para microplacas, coloque um poço para o controle negativo e um para o controle positivo, sele as lâminas não utilizadas o mais rápido possível e armazene-as entre 2 e 8 °C.
3. Adicione 100 μl dos controles negativo e positivo aos poços de controle negativo e positivo, respectivamente; adicione 100 μl da amostra diluída a cada poço.
4. Misture bem, cubra com a película protetora e incube em uma incubadora a 37°C por 30 minutos.
5. Retire o excesso de líquido dos orifícios, adicione 250 μl da solução de limpeza em cada orifício, lave uniformemente agitando por 60 segundos e descarte. Repita a lavagem 5 vezes e, após cada lavagem, seque o líquido com leves batidinhas.
6. Adicione 100 μl do marcador enzimático a cada poço e deixe reagir a 37 °C em local escuro por 30 minutos.
7. Escorra o líquido dos orifícios, adicione 250 μl da solução de limpeza em cada orifício, lave uniformemente agitando por 60 segundos e descarte. Repita a lavagem 5 vezes e, após cada lavagem, seque o líquido com leves batidinhas.
8. De acordo com a quantidade da amostra, misture a solução reveladora de cor A e a solução B em proporções de volumes iguais para preparar a solução de trabalho do substrato, pronta para uso imediato. Adicione 100 μl a cada poço e incube a 37 °C em local escuro por 10 minutos.
9. Adicione 100 μl da solução de parada a cada poço, misture bem e meça o valor de absorbância (valor de DO) de cada poço a 450 nm.
Valores de referência
Em condições experimentais normais, a densidade óptica (DO) do controle positivo em relação à DO do controle negativo é > 0,2.
Interpretação dos resultados dos testes
1. S/P = (DO da amostra - DO do controle negativo) / (DO do controle positivo - DO do controle negativo).
2. S/P ≥ 0,4 indica um resultado positivo.
3. 0,2
4. Quando S/P < 0,2, o resultado é interpretado como negativo.
Limitações dos métodos de teste
1. Este kit destina-se apenas a uma avaliação preliminar da possível infecção pelo vírus da raiva no indivíduo; por favor, considere as circunstâncias específicas do contexto clínico.
2. Este kit destina-se exclusivamente a uso em pesquisa e não deve ser utilizado em experimentos com seres humanos.
Notas
1. É obrigatório o uso de luvas e roupas de proteção durante os experimentos, e os protocolos de desinfecção e isolamento devem ser rigorosamente seguidos e implementados. Todos os resíduos experimentais devem ser tratados como agentes infecciosos.
2. Os terrários são corrosivos e devem ser mantidos longe do contato com a pele e as roupas. Em caso de contato acidental, lave imediatamente com bastante água corrente.
3. Quando as placas de microtitulação forem retiradas da refrigeração, devem ser deixadas em temperatura ambiente antes de serem abertas. As placas não utilizadas devem ser armazenadas em sacos selados contendo dessecante.
4. Os detergentes concentrados tendem a cristalizar a baixas temperaturas; se necessário, os cristais podem ser completamente dissolvidos em banho-maria a 37°C.
5. Ao lavar, preencha todos os orifícios com líquido para evitar que enzimas livres se acumulem nas aberturas e impeçam a limpeza.
6. As amostras utilizadas para os testes devem ser mantidas frescas.
7. Os resultados dos testes devem ser determinados com base nas leituras do leitor de microplacas.
8. Os componentes dos reagentes de lotes diferentes não devem ser misturados.
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